RESUMO A ocorrência de Fusarium spp. é um dos problemas mais limitantes em viveiros, esse patógeno pode ser transmitido via semente e causar danos em pré e pós-emergência. O presente trabalho objetivou identificar isolados de Fusarium spp. a nível de espécie e verificar a patogenicidade desses isolados em lotes de sementes de Pinus elliottii e P. taeda. Foram utilizados dois isolados do patógeno e cinco lotes de sementes de Pinus spp. Para caracterização molecular, sequenciaram-se as regiões genômicas: ITS e fator de elongação 1-α (tef1), para morfologia dos isolados utilizaram-se chaves de identificação específica para o gênero Fusarium. O teste de patogenicidade foi realizado através do contato das sementes com a cultura fúngica por 48 horas, seguida de semeadura em areia. As variáveis avaliadas foram: índice de velocidade de emergência, porcentagem de emergência, plântulas sintomáticas e tombamento de plântulas. O isolado F1UFSM foi identificado como Fusarium verticillioides e o F2UFSM como F. oxysporum. Ambos foram patogênicos a P. taeda e P. elliottii, causando redução no percentual de emergência e tombamento de plântulas.

ABSTRACT Occurrence of Fusarium spp. is one of the problems, most limiting to growth of seedlings, in nurseries. This pathogen can be transmitted via seeds and causes damages to the seedlings during pre- and post-emergence stages. The present study aimed to identify Fusarium spp. at the species level based on morphological and molecular characteristics and to verify the pathogenicity of these isolates in seeds lots of Pinus elliottii and P. taeda. For this, we used two Fusarium isolates and five lots of Pinus spp. seeds. Morphological characterization was performed based on a key, specific to Fusarium spp. identification, whereas, molecular identification was carried out by amplification and sequencing of the regions from internal transcribed spacer (ITS) and the elongation factor 1-α (tef1). The pathogenicity test was conducted through the contact of the seeds with fungal culture for 48 h, followed by sowing them in sand. The variables evaluated were emergency speed index, percentage of emergency, non-emergency seeds, symptomatic seedlings, and seedling damping-off. One isolate, F1UFSM, was identified as F. verticillioides and another isolate, F2UFSM, was identified as F. oxysporum. Both the isolates were pathogenic to the seeds of Pinus spp., causing a reduction in the percentage of emergence and seedling damping-off.

RESUMO: O fungo Sclerotinia sclerotiorum é responsável por perdas significativas na produção de alface. Por se tratar de um fungo habitante do solo seu manejo é dificultado, sendo uma alternativa o uso do controle biológico utilizando espécies do gênero Trichoderma. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram identificar as espécies Trichoderma spp. nativas presentes em solo com (CP) e sem mofo-branco (SP), avaliar a velocidade de crescimento e o antagonismo in vitro dos isolados de Trichoderma spp. à S. sclerotiorum e verificar o potencial de biocontrole proporcionado por Trichoderma spp. microbiolizado em sementes de alface, cultivadas em substrato infestado com S. sclerotiorum. Foram utilizados isolados de Trichoderma spp. oriundos de áreas com e sem histórico de mofo-branco ou armazenados em água. Nos ensaios in vitro foram avaliados a taxa de crescimento micelial e a esporulação dos isolados de Trichoderma spp. e controle de Trichoderma spp. versus S. sclerotiorum. Para o ensaio in vivo sementes de alface foram microbiolizadas com Trichoderma spp. e o substrato infestado com S. sclerotiorum. Os isolados nativos de Trichoderma identificados pertencem às espécies T. koningiopsis e T. asperellum. Os isolados CP apresentaram maior taxa de crescimento micelial quando comparado aos SP e aos armazenados, enquanto que os isolados armazenados apresentaram melhores respostas na confrontação direta. A aplicação de Trichoderma spp. promoveu o crescimento de plântulas de alface mais vigorosas quando comparadas à testemunha, assim como um bom desenvolvimento das plântulas na presença do patógeno.

ABSTRACT: The fungus Sclerotinia sclerotiorum, handles significant losses in lettuce production. Being a soil borne fungus, its management is difficult, and an alternative is the use of biological control using species of the Trichoderma genus. Thus, the objectives of this study were to identify native species of Trichoderma spp. presents in the soil with (CP) and without white mold (SP), evaluate the growth rate and in vitro antagonism of Trichoderma spp. against S. sclerotiorum and to verify the biocontrol potential of Trichoderma spp. microbiolized lettuce seeds, growing in substrate infested with S. sclerotiorum. Trichoderma spp. isolates were obtained from areas with and without history of white mold or stored in water. Mycelial growth rate and sporulation of the Trichoderma spp. isolates and control of Trichoderma spp. versus S. sclerotiorum in the in vitro essays. For thein vivo essay, lettuce seeds were microbiolized with Trichoderma spp. and the substrate was infested with S. sclerotiorum. The native isolates of Trichoderma identified belong to T. koningiopsis and T. asperellum species. The CP isolates had higher mycelial growth rates when compared to the SP isolates and stored while the stored isolates showed better responses in confrontation. The application of Trichoderma spp. promoted higher seedlings quality compared to control, as well as good seedlings development in the presence of the pathogen.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da microbiolização de sementes com Bacillus subtilis, associada às técnicas de restrição hídrica e peliculização sobre o desempenho fisiológico de sementes de milho (Zea mays L.). A microbiolização das sementes sem técnica adicional foi realizada com o produto comercial Rhizoliptus® (Bacillus subtilis). A restrição hídrica foi realizada em meio BDA (Batata - Dextrose - Ágar) + manitol (-0,7 MPa), sobre o qual a bactéria foi cultivada por 48 h. Foram distribuídas 100 sementes de milho desinfestadas em cada placa. Quando houve protrusão radicular na primeira semente, as demais foram retiradas e mantidas em ambiente de laboratório por 48 h. A peliculização foi realizada com a adição do polímero Color Seed HE (50 mL kg-1) à calda de tratamento contendo Bacillus subtilis. As sementes foram mantidas por 48 h em ambiente de laboratório. Foi utilizado um tratamento associando a peliculização e a restrição hídrica nas sementes microbiolizadas e ainda, um tratamento testemunha, sem adição de Bacillus subtilis. Bacillus subtilis não apresenta efeito sobre a sanidade de sementes, entretanto, contribui para o crescimento e desenvolvimento de plântulas de milho, sendo influenciado pela técnica de microbiolização utilizada. A associação da restrição hídrica com a peliculização proporciona melhor desempenho no efeito da microbiolização com Bacillus subtilis.

The aim of this study was to evaluate the effect on the physiological performance of maize seeds (Zea mays L.) of micro-priming with Bacillus subtilis associated with techniques of water restriction and seed-coating. The micro-priming of the seeds, without any additional techniques, was carried out using a commercial product, Rhizoliptus ® (Bacillus subtilis). Water restriction was carried out using a PDA medium (Potato - Dextrose - Agar) with mannitol (-0.7 MPa), upon which the culture was grown for 48hours. One hundred sterilized corn seeds were placed in each dish. Once root protrusion occurred in one seed, the rest were removed and kept in a laboratory environment for 48 hours. The coating was carried out by the addition of Seed Polymer Color HE (50 ml kg-1) to the priming mixture containing the Bacillus subtilis. The seeds were kept for 48 hours in a laboratory environment. A treatment which associated seed coating and water restriction was used on the micro-primed seeds, together with a control treatment without the addition of Bacillus subtilis. The Bacillus subtilis has no effect on the health of the seeds it; does however contribute to the growth and development of the maize seedlings, being influenced by the micro-priming technique used. The use of water restriction associated with seed coating provides better results when micro-priming with Bacillus subtilis.

A patogenicidade e o biocontrole de Fusarium oxysporum (F1s, F3s e F4s) e F. proliferatum (F2s) por Trichoderma koningiopsis (T1s e T3s), T. tomentosum (T2s e T4s) e T. asperellum (T5s) foi avaliada. Testes in vitro, confrontação direta, e in vivo, por inoculação de substrato com Fusarium spp. e Trichoderma spp., isolados e combinados, foram conduzidos em condições controladas. A habilidade de Fusarium spp. causarem damping off em plântulas de soja, cv. ‘FT-Estrela’, foi avaliada in vivo em tratamentos que receberam apenas inóculo de Fusarium spp. isolados de Trichoderma spp. promoveram o crescimento de raiz e incrementaram o peso fresco e seco de plântulas de soja. Os isolados de Fusarium spp. F1s e F4s foram os mais agressivos, com 100 e 75% de damping off, respectivamente. Algumas combinações com Trichoderma spp. potencializaram a patogenicidade de F1s e F3s, com 100 e 75% de damping off, respectivamente. Os isolados de Trichoderma spp. podem controlar Fusarium spp. avaliados neste estudo.

Pathogenicity and biocontrol of Fusarium oxysporum (F1s, F3s and F4s) and F. proliferatum (F2s) by Trichoderma koningiopsis (T1s and T3s), T. tomentosum (T2s and T4s) and T. asperellum (T5s) was evaluated. In vitro tests, direct confrontation, and in vivo, substrate inoculation with Fusarium spp. and Trichoderma spp., isolated or combined, were conducted under controlled conditions. The ability of Fusarium spp. cause damping off in seedlings of soybean cv. ‘FT-Estrela’, was evaluated in vivo in treatments that received only inoculum of Fusarium spp. Trichoderma spp. isolates promoted root growth and increased the fresh and dry weight of soybean seedlings. Fusarium spp. isolates F1s and F4s were the most aggressive, with 100 and 75% of damping off, respectively. Some combinations with Trichoderma spp. potentiated the pathogenicity of F1s and F3s, with 100 and 75% of damping off, respectively. The Trichoderma spp. can control Fusarium spp. evaluated in this study.

Este trabalho teve por objetivo isolar, identificar e selecionar isolado(s) de Fusarium spp. em sementes de pepino e verificar a sua influência na qualidade fisiológica. Foram utilizados três sublotes e os tratamentos consistiram em: testemunha absoluta; BDA + manitol - 0,8Mpa; BDA; BDA + manitol - 0,8Mpa + fungo; e BDA + fungo. A qualidade fisiológica foi avaliada através de testes em laboratório e casa de vegetação. Cinco isolados de Fusarium verticillioides foram identificados e a sua transmissão através das sementes para plantas não foi possível afirmar. A técnica da restrição hídrica foi eficiente para proporcionar infecção das sementes, sabendo que e o fungo influencia negativamente na qualidade fisiológica das sementes de pepino da cultivar Caipira.

This research had the objective of isolate, identifying and select isolates (s) of Fusarium spp. in cucumber seeds and checking the influence of this (these) isolate(s) on the physiological quality. Three batches were used and treatments utilized consisted in: absolute witness; PDA + mannitol - 0.8Mpa; PDA pure; PDA + mannitol - 0.8Mpa + fungi; and PDA + fungi. The physiological quality was assessed by tests carried out in laboratory and greenhouse. Five isolates off Fusarium verticillioides were isolated and it was not possible to affirm its transmission through seed. The hydric restriction technique was efficient to provide the infection of cucumber seeds, since this fungus affected the physiological quality of cucumber seeds of this cultivar.